由西北農(nóng)林科技大學博士生導師王躍進教授主持完成的國家轉(zhuǎn)基因植物研究與產(chǎn)業(yè)化開發(fā)專項“中國葡萄屬植物野生種抗白粉病基因克隆”研究項目，經(jīng)過6年的探索研究，日前，在陜西楊凌通過教育部組織的科技成果鑒定。
為了利用我國野生葡萄的抗病基因并通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗病優(yōu)質(zhì)葡萄新品種，王躍進率領(lǐng)的科研項目組首次采用mrna差異顯示技術(shù)，從高抗葡萄白粉病的中國葡萄屬野生種華東葡萄白河-35-1中獲得抗白粉病相關(guān)基因cdna片斷20個，采用抗病基因同源序列的方法獲得抗病相關(guān)基因cdna片斷7個。首次從中國葡萄屬野生種華東葡萄白河-35-1中克隆了抗白粉病芷合成酶基因家族成員6個，乙二醛氧化酶基因1個，醛脫氫酶基因家族成員3個，病程相關(guān)蛋白基因1個，幾丁質(zhì)酶基因家族成員2個，共計14個基因。科研人員對這些基因進行了體外表達研究，分離純化了基因的表達產(chǎn)物，制備了多克隆抗體，構(gòu)建了抗白粉病相關(guān)基因表達載體，采用農(nóng)桿菌介導的方法，對歐洲葡萄無核白、底來特和愛莫無核的葉片，以及愛莫無核胚珠誘導的胚性愈傷組織和胚狀體進行了遺傳轉(zhuǎn)化，獲得轉(zhuǎn)基因葡萄植株56株。構(gòu)建了中國葡萄屬野生種華東葡萄白河-35-1抗白粉病基因cdna文庫，獲得抗白粉病基因相關(guān)ests序列145個，其中抗白粉病相關(guān)基因cdna全長序列17個，并首次發(fā)現(xiàn)抗白粉病相關(guān)新基因5個，首次獲得中國葡萄屬野生種抗病候選基因cdna片斷47個。西北農(nóng)林科技大學此次所獲得的中國葡萄屬野生種抗白粉病相關(guān)基因和中國葡萄屬野生種抗病候選基因dna片斷47個，抗白粉病基因相關(guān)ests序列145個，不僅具有重要的理論價值，而且對于我國乃至世界葡萄的發(fā)展具有重要的實踐意義，同時對獲得具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的新品種具有很重要的意義。
鑒定委員會一致認為，該課題針對世界葡萄生產(chǎn)中存在的問題，綜合采用現(xiàn)代分子生物學技術(shù)，在抗白粉病基因克隆與功能分析、cdna文庫構(gòu)建和相關(guān)est克隆以及轉(zhuǎn)基因植株培育等方面具有明顯的創(chuàng)新性，研究成果居國際領(lǐng)先水平。(科技)