茶堿、咯利普蘭和acetamide—45對gl62酵母細(xì)胞表達(dá)的人磷酸二酯酶4a的抑制作用

發(fā)布時間：2024-02-29

目的：研究gl62酵母細(xì)胞中磷酸二酯酶4a（pde4a）的誘導(dǎo)表達(dá)和茶堿、咯利普蘭、n－對氟芐基－3－[(n-4-吡啶）－乙酰胺]-吲哚45（acetamide-45)對gl62酶母細(xì)胞誘導(dǎo)提取物中pde4a活性的抑制作用。方法：克隆了人pde4a基因的gl62酵母細(xì)胞在cuso4 150μmol/l條件下誘導(dǎo)表達(dá)pde4a并提取，用高效液相色譜法測定pde4a的活性。結(jié)果：gl62酵母細(xì)胞在cuso4誘導(dǎo)下的表達(dá)產(chǎn)物蛋白分子在62kda和83kda之間，表達(dá)產(chǎn)物的pde4a的活性在3h達(dá)到最大為（188±23）μmol·g^-1·min^-1，其米氏常數(shù)km為（17．7±2．6）μmol·l^-1.茶堿，咯利普蘭和acetamide-45對誘導(dǎo)提取物pde4a活性的ic50（95％可信限）分別為1642（989－2727），4．58（3．45－6．08）和275（170－444）μmol·l^-1。結(jié)論：gl62酵母細(xì)胞經(jīng)cuso4誘導(dǎo)可表達(dá)pde4a，茶堿、咯利普蘭和acetamide-45能抑制其活性，gl62酵母細(xì)胞的誘導(dǎo)表達(dá)提取物可用來研究pde4a及其抑制劑。完成機(jī)構(gòu)：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院國家藥品監(jiān)督管理局呼吸藥物研究實驗室，杭州310031，中國