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      2. 低速離心機(jī)分離法根據(jù)細(xì)胞大小和密度進(jìn)行分離

        發(fā)布時(shí)間:2024-02-27
        離心機(jī)是一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的高速旋轉(zhuǎn)機(jī)械,它是利用離心力,不同物質(zhì)在離心場(chǎng)中沉淀速度的差異,對(duì)混合溶液進(jìn)行快速分離的專門設(shè)備,是一種將裝有樣品溶液的離心管、瓶或袋通過離心機(jī)轉(zhuǎn)子置于離心軸上,利用轉(zhuǎn)頭繞軸高速旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力,使樣品中不同性質(zhì)顆粒相互分離的特殊裝置。可以實(shí)現(xiàn)樣品的分析、分離。
        從轉(zhuǎn)速看,臺(tái)式離心機(jī)基本屬于低速、高速離心機(jī)的范疇,因此,具有低速、高速離心機(jī)的特點(diǎn)。與落地式離心機(jī)相比,只不過只是尺寸和容量小一些。
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        離心機(jī)的式樣和型號(hào)很多,有國產(chǎn)的和進(jìn)口的,按用途可分為分析式離心機(jī)和制備式離心機(jī);按轉(zhuǎn)速可劃分為:
        普通離心機(jī)(低速)<10000r/min;
        高速離心機(jī)10000 ~30000r/rain;
        超速離心機(jī)30000 ~80000r/min;
        超高速離心機(jī)>80000r/min;
        特定細(xì)胞株的功能、行為和生化特性的分析在現(xiàn)有技術(shù)水平上只能通過相對(duì)純的細(xì)胞株才能弄清,然而從組織、血液和其它體液標(biāo)本中獲得的細(xì)胞都是不同類型細(xì)胞的混合物,并且不同細(xì)胞或同一細(xì)胞株的不同周期與其它細(xì)胞相比,其代謝過程、生物特性和理化參數(shù)大多都有差異。
        細(xì)胞分離技術(shù)包括離心技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)和細(xì)胞電泳。離心是研究如細(xì)胞核、線粒體、高爾基體、溶酶體和微體,以及各種大分子基本手段。流式細(xì)胞術(shù)是對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行快速定量分析與分選的一門技術(shù)。細(xì)胞電泳是指在一定ph 值下細(xì)胞表面帶有凈的正或負(fù)電荷,能在外加電場(chǎng)的作用下發(fā)生泳動(dòng)。
        分離不同細(xì)胞株的方法概括起來可分為兩大類:
        一是:根據(jù)細(xì)胞的物理學(xué)特性差異分離,包括低速離心機(jī)分離法、物理吸附法、凝膠色譜法和細(xì)胞電泳法等;
        二是:根據(jù)細(xì)胞的生物學(xué)特性差異分離,包括花環(huán)形成法和單層細(xì)胞免疫吸收法等。
        在諸多分離方法中,低速離心機(jī)分離法根據(jù)細(xì)胞大小和密度進(jìn)行分離,分離介質(zhì)選擇廣泛,原理簡(jiǎn)單,對(duì)細(xì)胞損傷小,可適用于各種不同的研究目的,已成為生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的分離工具。
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        細(xì)胞組分是指細(xì)胞內(nèi)部的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu),如細(xì)胞核、線粒體、溶酶體、高爾基復(fù)合體和微粒體等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。人們可以像把細(xì)胞從組織中分離出來進(jìn)行研究一樣,把細(xì)胞組分從細(xì)胞中分離純化出來,以研究它們各自*的化學(xué)組成、代謝特點(diǎn)、酶活性和具體功能。盡管在一個(gè)世紀(jì)前就有人試圖分離細(xì)胞器,但直到20世紀(jì)40年代有了超速離心機(jī)和細(xì)胞勻漿技術(shù)后,才真正建立了細(xì)胞器的分離技術(shù)。用這一技術(shù)可以獲得相對(duì)純凈的各種細(xì)胞器甚至大分子顆粒。
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