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      2. 朱頂紅的組織培養(yǎng)技術(shù)

        發(fā)布時間:2024-03-03
        朱頂紅系石蒜孤挺花屬多年生常綠草本植物。其地下具有鱗莖,葉基生、寬橢圓形,長約30cm、寬約15cm;花葶自基部抽出高60cm的傘形花序,著花3~6朵,花冠筒狀,具裂片2輪,各3片,開張,花徑約8cm,有香氣,雄蕊著生花冠筒喉部,花絲基部相連;蒴果,種子大,呈圓形;以鱗莖為宿存器官越冬,5月上旬至6月初開花;花大且色彩濃艷,適應(yīng)性強(qiáng)而廣泛應(yīng)用于盆栽、切花、園林綠化上。朱頂紅園藝品種較多,在北美和西歐鮮切花及盆栽庭園品種的推廣多是通過快速繁殖供應(yīng)市場。紅猛士品種系列的朱頂紅可用于盆栽,重瓣,花瓣圓形,花大,開花在初夏,四季都可開花,是難得的盆栽和花壇布置材料,價格昂貴。通過組織培養(yǎng)快速繁殖是目前大批量生產(chǎn)滿足市場需要的唯一途徑,本試驗的結(jié)果可為朱頂紅工廠化生產(chǎn)提供一定的依據(jù)。
        (1)愈傷組織的誘導(dǎo)
        配制初代培養(yǎng)基:初代培養(yǎng)基的主要植物需要成分有大量元素、微量元素、有機(jī)成分、激素和蔗糖,準(zhǔn)確量取培養(yǎng)基的各成分,并充分混合成混合溶液;然后溶解瓊脂,待完全溶化后加入混合溶液、蒸餾水至刻度線,最后將培養(yǎng)基的ph值調(diào)至5.8。最適不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ms+0.5mg/lkt+0.5mg/l6-ba,不定芽增殖培養(yǎng)基為ms+1.5mg/lkt+0.05mg/l6-ba,不定根培養(yǎng)基為ms+0.3mg/lnaa。分裝培養(yǎng)基:分裝引流時要確保培養(yǎng)基不污染瓶口,分裝好的培養(yǎng)基做好記號放置于高壓滅菌鍋中滅菌,放置培養(yǎng)基時不要倒置以免培養(yǎng)基倒流出來。
        (2)選擇
        露地栽培生長健壯的幼齡小球為材料,先在室內(nèi)消毒過的珍珠巖基質(zhì)中栽植30天,待新根長出以后,取出用自來水沖凈表層,用手術(shù)刀去除須根、葉和鱗莖上部的鱗片,只保留鱗莖盤。清理好的鱗莖盤用自來水沖洗干凈,并用濾紙吸干水分置于超凈工作臺上備用。在接種前先用75%的酒精浸泡鱗莖盤30~60秒,用無菌水沖洗一次,然后用0.1%的氯化汞溶液消毒15分鐘,最后用無菌水浸泡3~5次、每次5~10分鐘,并用無菌鑷子不斷攪動,去除殘留在外植體上的氯化汞。將消毒好的材料放在無菌濾紙上吸干水分,切成5mm×5mm×5mm大小的外植體塊接種于已配制好的培養(yǎng)基中,一瓶培養(yǎng)基只接種一個切塊。接種好的外植體放置在培養(yǎng)室中培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度為20~25℃,每天光照時間為10~20小時,光照強(qiáng)度為1000—20001x。愈傷組織塊不能切得太小,否則分化會太慢;若愈傷組織塊太大很快就會長滿瓶,不易取出,故其大小要適宜。
        (3)不定芽的生根培養(yǎng)
        將繼代培養(yǎng)好的小芽切下分別接種于的培養(yǎng)基中。在操作過程中一定要將小芽基部的愈傷組織切除干凈,否則根會長在愈傷組織上,影響其成活率。
        (4)生根小苗的移栽
        試管苗不經(jīng)過生根可以直接出瓶。小苗生根后先打開瓶口,讓小苗在室外適應(yīng)外界環(huán)境,2~3天后取出瓶苗,洗凈瓶苗基部的瓊脂,最后將小苗移栽至壤土∶腐葉土∶河沙為5∶3∶1(體積比)基質(zhì)中,成活率可達(dá)98%。在洗苗過程中一定要洗凈瓊脂,防止滋生微生物。
        (5)朱頂紅取材最好在生長旺盛的春季,以確保其具備較強(qiáng)的分生能力。
        在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)朱頂紅的鱗片與鱗片之間的夾層有凸起出現(xiàn),上部產(chǎn)生數(shù)個小仔球,小仔球上部逐漸變綠,將獨(dú)立的小仔球轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中數(shù)日后形成小球叢。朱頂紅比較容易感染病菌,最常見的是紅斑病。取材時須取無病蟲害的部位,或引進(jìn)種子在試管中播種,生根發(fā)芽后再進(jìn)行培養(yǎng)。若材料豐富,可在解剖顯微鏡下剝?nèi)∏o尖的途徑來獲得無病毒的材料。但此方法會使生長點(diǎn)長得很慢,周期很長,一般從誘導(dǎo)至生根培養(yǎng)需90~120天。據(jù)本試驗觀察發(fā)現(xiàn),組培苗具有一定的馴化現(xiàn)象,經(jīng)過長時間的繼代培養(yǎng)后,只要加入極少量激素也可以達(dá)到一開始培養(yǎng)的效果;在煉苗過程中,發(fā)現(xiàn)球根花卉一般比較容易成活,試驗認(rèn)為,朱頂紅不經(jīng)過生根可以直接移入基質(zhì)中,成活率可達(dá)98%;朱頂紅在組織培養(yǎng)中,芽增殖率高,球小,須進(jìn)行壯苗培養(yǎng)以后生根,但在增殖培養(yǎng)基ms+lmg/lkt+0.1mg/lnaa中產(chǎn)生不定根,無需進(jìn)行生根培養(yǎng);朱頂紅的生長需要充足的光照,光照適宜,葉大、厚、肥且具有光澤,花大且艷;光照不足則抽出的花葶開不出花,由頂部花苞逐漸向下枯萎,葉子細(xì)且失去光澤、失綠;朱頂紅具有很強(qiáng)的向光性。在朱頂紅組培中,要特別注意試驗的激素配比,在ms+1mg/lkt+0.1mg/lnaa的培養(yǎng)基中既生根又長芽,愈傷組織很少;只加糠基腺嘌呤不長根。結(jié)果認(rèn)為分裂素與生長素比值小,有利于生根,相反則分化形成芽或愈傷組織。朱頂紅組培苗煉苗在帶有防蟲網(wǎng)的玻璃溫室內(nèi)進(jìn)行,基質(zhì)要進(jìn)行消毒,先用甲醛密封熏蒸7天,再打開讓甲醛徹底揮發(fā),裝入營養(yǎng)缽內(nèi)待用。
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