2.齒舌蘭輪斑病毒 (odontoglossum ringspot virus,簡稱orsv)
(1)病征:
根據(jù)報告,可以被 orsv 感染的蘭花種類有 20 個屬以上,不同蘭屬或種所產(chǎn)生的病征有差異。orsv 最早被發(fā)現(xiàn)時所紀(jì)錄的病征是輪斑,另外嵌紋、斑紋、黃化條紋、花色條斑,甚至壞疽形斑塊等病征均有記錄。也有部分蘭花種類感染 orsv 后并不表現(xiàn)病征,此現(xiàn)象在蝴蝶蘭上經(jīng)常發(fā)生。另外 orsv與 cymv 復(fù)合感染同一株蘭花,促使病征加重的現(xiàn)象在蘭花上極為普遍。
(2)病原菌:
分類:orsv屬煙草嵌紋病毒屬 (tobamovirus)。
分布:orsv目前與 cymv 并列為蘭花上發(fā)生最普遍的病毒。據(jù)判斷其分布已遍及全世界各地商業(yè)生產(chǎn)的蘭園。
(3)寄主: 自然界寄主以蘭科植物為主??山?jīng)由人工接種方式受感染的寄主包括gomphrena globosa、nicotiana tabacum cv. samsum及 n. benthamiana 等。
(4)形態(tài)與傳播方式:
orsv病毒形態(tài)為直硬桿狀顆粒,長度 300納米,寬度 18納米,顆粒中軸可清楚分辨有溝狀構(gòu)造。 傳播方式與cymv相同。
(5)診斷技術(shù):
根據(jù)病征表現(xiàn)對 orsv進(jìn)行診斷是蘭園中最普遍使用的方法,但其正確性常因蘭花品種對病毒感受性的差異或處于潛伏期而受影響,故其診斷與 cymv 相同,應(yīng)配合其他較敏感的方法為佳。
(6)應(yīng)用于 orsv 診斷之方法:
指示植物接種法。最常用的 orsv 指示植物有 gomphrena globosa、nicotiana tabacum cv. samsum 及 n. benthamiana 等。不過影響人工接種結(jié)果的因素有很多,操作者必須具備豐富經(jīng)驗,否則易導(dǎo)致誤診,而且由于時效的限制,無法處理大量樣品也是應(yīng)用此診斷方法的限制因素。
電子顯微鏡觀察法。應(yīng)用電子顯微鏡檢查病株是否有 orsv 的典型短桿狀顆粒,也為常用的方法,若再配合 orsv 抗體的應(yīng)用,可進(jìn)一步提升電子顯微鏡觀察的敏感度。
光學(xué)顯微鏡觀察法。近年來所發(fā)展的光學(xué)顯微鏡觀察法,可依據(jù) orsv 于寄主細(xì)胞質(zhì)內(nèi)所形成的特殊圓盤形或紡錘形結(jié)晶狀內(nèi)含體(crystalline inclusion) 作為判別的依據(jù)。
抗血清鑒定法。近年來應(yīng)用在 orsv診斷上最普遍的方法是抗血清鑒定法,特別是酵聯(lián)抗體法 (elisa) 及免疫點漬法( immunoblotting test ) 最為產(chǎn)業(yè)界所接受。
核酸檢查法。核酸檢查法自上世紀(jì)90年代以來逐漸被廣為應(yīng)用。核酸探針雜配法 (dna probe hybridization) 及聚合酵素連鎖反應(yīng)(pcr),亦已被發(fā)展成為 orsv的常用診斷方法。此類方法雖較抗血清法敏感,但技術(shù)門坎及經(jīng)濟(jì)成本也相對較高,僅應(yīng)用于少量珍貴蘭花種源的病毒篩檢工作。
(7)發(fā)生
orsv 的發(fā)生與 cymv 相同,但orsv 在生物體外的性質(zhì)較 cymv 穩(wěn)定,可于污染的器具或植材上存活更久時間,因此防治上比cymv 更為棘手,已發(fā)生過orsv的蘭園應(yīng)更加注意避免病毒蔓延。
(8)防治方法
防治管理方法同 cymv ,但消毒處理工具時因 orsv 性質(zhì)更為穩(wěn)定,牛奶消毒無效,應(yīng)避免使用。
3.胡瓜嵌紋病毒 (cucumber mosaic virus,簡稱cmv)
(1) 病征:
cmv 感染蘭花的例子并不多,國內(nèi)僅在蝴蝶蘭上曾經(jīng)有報告。主要病征為葉部產(chǎn)生黃化條紋或全葉黃化。另外,感染cmv的蝴蝶蘭紅色系品種的花瓣上會產(chǎn)生褪色條斑。
(2)病原菌:
分類:cmv歸類于 bromoviridae中四個屬之一,稱為 cucumovirus。
分布: cmv 可感染為數(shù)極多的經(jīng)濟(jì)作物種類,其分布遍及全球各地。
(3)寄主:
cmv 的寄主范圍極為寬廣??晌:Χ鄶?shù)經(jīng)濟(jì)作物,涵蓋單子葉及雙子葉植物,包括瓜類,如胡瓜、絲瓜、西瓜、洋香瓜、甜瓜,茄科作物,如西紅柿、甜椒、辣椒、煙草,果樹類,如百香果、香蕉以及種類繁多的觀賞花卉植物,如唐菖蒲、金花石蒜、百合等。另外cmv也可感染為數(shù)極多的野生植物。
(4)形態(tài)及傳播方式:
病毒形態(tài)為球形多面體,直徑 28至30納米。顆粒體對中性氯鹽及陰離子界面活性劑頗為敏感,經(jīng)處理后極易崩解。
傳播方式: cmv 可借汁液傳染,亦可由蚜蟲以非永續(xù)方式 (non-persistent) 傳播??蓚鞑?cmv 的蚜蟲種類已超過 60 種。cmv 不會經(jīng)由蘭花種子帶毒傳播。
(5)診斷技術(shù)
cmv 感染蝴蝶蘭及石斛蘭所造成的黃化條斑形病征與感染 cymv 的癥狀頗為相似,因此僅根據(jù)病征作為 cmv 的診斷依據(jù)并不可靠。較理想的 cmv 診斷方法為應(yīng)用抗血清鑒定法,包括酵聯(lián)抗體法 (elisa) 和免疫點漬法( immunoblotting test )均可適用。另外近年來所發(fā)展的 rt-pcr 及核酸探針雜配法亦可應(yīng)用于 cmv 的檢測。
(6)發(fā)生生態(tài):
cmv 在蘭花上的發(fā)生形態(tài)與 cymv 及 orsv 截然不同。cmv 主要來源于蘭園周圍的其他感病作物,再經(jīng)由蚜蟲以非永續(xù)方式(non-persistent) 媒介傳入蘭花。由于可傳播 cmv 的蚜蟲種類超過 60 種,加上 cmv 寄主范圍廣泛,因此在秋冬蚜蟲族群高峰季節(jié)cmv的傳播極為普遍。若蘭花栽培在開放空間,則被 cmv 感染的機(jī)會較大,但國內(nèi)目前蝴蝶蘭均栽培于密閉式的溫室或網(wǎng)室,除非種苗組織培養(yǎng)生產(chǎn)過程中母本為帶毒者,否則 cmv 大舉發(fā)生的機(jī)會并不高。
(7)防治方法:
防治 cmv 所使用的方法與對策同 orsv 及 cymv 。