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      2. 犬細小病毒(CPV)ELISA試劑盒熱銷

        發(fā)布時間:2024-02-29
        犬細小病毒(cpv)elisa試劑盒熱銷
        本試劑盒僅供研究使用。
        檢測范圍: 96t
        1ng/l - 32ng/l
        使用目的:
        本試劑盒用于測定犬血清、血漿及相關液體樣本中細小病毒(cpv)含量。
        犬細小病毒(cpv)elisa試劑盒熱銷實驗原理
        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中犬細小病毒(cpv)水平。用純化的犬細小病毒(cpv)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細小病毒(cpv),再與hrp標記的細小病毒(cpv)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物tmb顯色。tmb在hrp酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細小病毒(cpv)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(od值),通過標準曲線計算樣品中犬細小病毒(cpv)濃度。
        試劑盒組成
        1
        30倍濃縮洗滌液
        20ml×1瓶
        7
        終止液
        6ml×1瓶
        2
        酶標試劑
        6ml×1瓶
        8
        標準品(64ng/l)
        0.5ml×1瓶
        3
        酶標包被板
        12孔×8條
        9
        標準品稀釋液
        1.5ml×1瓶
        4
        樣品稀釋液
        6ml×1瓶
        10
        說明書
        1份
        5
        顯色劑a液
        6ml×1瓶
        11
        封板膜
        2張
        6
        顯色劑b液
        6ml×1/瓶
        12
        密封袋
        1個
        標本要求
        1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
        2.不能檢測含nan3的樣品,因nan3抑制辣根過氧化物酶的(hrp)活性。
        操作步驟
        標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。32ng/l
        5號標準品
        150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
        16ng/l
        4號標準品
        150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
        8ng/l
        3號標準品
        150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
        4ng/l
        2號標準品
        150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
        2ng/l
        1號標準品
        150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
        加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結:
        計算
        以標準物的濃度為橫坐標,od值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的od值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與od值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的od值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
        注意事項
        1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
        2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
        3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
        請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本od值大于標準品孔*孔的od值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。
        7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
        8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
        9.本試劑不同批號組分不得混用。
        10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
        保存條件及有效期
        1.試劑盒保存:;2-8℃。
        2.有效期:6個月
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