近年來，納米顆粒被廣泛應(yīng)用于藥物體內(nèi)輸送的領(lǐng)域，部分已經(jīng)進(jìn)入市場或處于臨床試驗(yàn)研究階段。
2020年以來，新冠疫情肆虐，自從科學(xué)家們研制出了mrna疫苗后，脂質(zhì)體納米顆粒越來越得到關(guān)注，活性物質(zhì)在體內(nèi)的安全運(yùn)輸問題成為了一大難題。通過納米顆粒對藥物進(jìn)行包裹，能夠延長其在體內(nèi)循環(huán)、釋放的時間，有效提高藥效，核酸類藥物能通過這種負(fù)載方式獲得更大的優(yōu)勢。
圖1 釜式工藝（左）和連續(xù)流（右）中dna和聚合物混合效果對比
而與傳統(tǒng)的間歇釜式工藝相比，連續(xù)化的負(fù)載和組裝更容易獲得可重現(xiàn)的，穩(wěn)定的高質(zhì)量工藝和產(chǎn)品（圖1），后者也逐漸成為了科學(xué)研究的重點(diǎn)。
澳大利亞新南威爾士大學(xué)的martina教授，對負(fù)載核酸藥物的納米顆粒聚合物的連續(xù)制備這一研究領(lǐng)域進(jìn)行了綜述。
主要包括以下內(nèi)容：
傳統(tǒng)制備工藝中存在的缺陷
不同類型的連續(xù)流制備裝置及原理
連續(xù)制備過程中對納米顆粒粒徑大小的影響因素
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負(fù)載核酸通常有兩種方法：
圖5. 使用流動組裝制備核酸負(fù)載納米顆粒的聚合物
圖5中所示的陽離子電荷取決于ph值(co、lpo和lpoe是loy等人給出的縮寫，分別作為核心低聚物、脂質(zhì)錨定的peg12低聚物和不含谷氨酸的脂質(zhì)錨定peg12寡聚物）。
表1. 使用流動裝置制備核酸負(fù)載納米顆粒所用聚合物的概述
表1中探索了三種不同的體系和方法：
兩種水溶液的混合，分別含有聚合物和核酸、納米沉淀 和基于液滴的微流體。
loy團(tuán)隊報道了一種負(fù)載sirna核酸的聚合物納米顆粒要優(yōu)于釜式結(jié)果。
santhanes團(tuán)隊使用微通道納米沉淀，成功制備了具有更小pdi的納米顆粒。
naeini團(tuán)隊開發(fā)了一種在線混合系統(tǒng)，在殼聚糖-sirna和殼聚糖-pdna體系中，通過高雷諾數(shù)下的湍流混合，最大限度的減小了粒徑和pdi，且能夠通過調(diào)控核酸的濃度，來調(diào)節(jié)納米顆粒的尺寸，同時保證了pdi小于0.2。
納米顆粒是通過用核酸壓實(shí)陽離子聚合物以形成復(fù)合物來形成的；
或者通常在陽離子聚合物或陽離子表面活性劑的幫助下，通過將帶負(fù)電荷的負(fù)載包埋到中性的、通常是疏水性的聚合物中來形成的。
在單通道均相混合系統(tǒng)中，核酸和陽離子聚合物通過靜電結(jié)合組裝，可以通過改變離子強(qiáng)度、ph值以及聚合物的性質(zhì)來得到不同性質(zhì)的納米顆粒；而在多相的系統(tǒng)中，可以通過t形通道口尺寸的調(diào)節(jié)，實(shí)現(xiàn)對納米顆粒粒徑的控制。
4.1 傳質(zhì)的影響
間歇釜中攪拌的工藝，由于其局部異質(zhì)性高，生產(chǎn)的納米顆粒分散性較高。相比之下，連續(xù)流技術(shù)能有效提高混合效率，粒徑尺寸和pdi都要小于釜式條件。
4.2 流速即反應(yīng)停留時間的影響
此外，兩股物料的流速比對納米顆粒的粒徑也有較大的影響。在pdna負(fù)載的脂質(zhì)體聚合物納米顆粒的研究過程中，人們嘗試了水相:有機(jī)相3:1和5:1的不同條件，更低的流速比會形成更小的尺寸和pdi值。甚至在均相混合體系中，流速比亦對最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有一定影響。
4.3 物料摩爾比的影響
n/p比指的是陽離子聚合物中的氨基氮（n）原子和核酸中的磷酸中磷（p）原子的摩爾比。
koh團(tuán)隊研究發(fā)現(xiàn)，較高的n/p比通常能制備出更小粒徑的納米顆粒和更小的pdi值。
protopapa團(tuán)隊通過圖4的實(shí)驗(yàn)裝置，同時對7種不同的n/p比進(jìn)行測試。
此外，聚合物的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)，核酸的類型，兩者的濃度不同，都會對所得的納米顆粒的粒徑大小，及分布均勻性產(chǎn)生影響。
研究表明，負(fù)載藥物的納米顆粒的連續(xù)制備具有混合均勻、易于控制粒徑分布和形態(tài)、高效率的優(yōu)點(diǎn)；
目前，藥物負(fù)載的納米顆粒的連續(xù)組裝已成為實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)中的一種成熟技術(shù)。研究人員可以從各種裝置設(shè)備中根據(jù)自己的研究需要來中進(jìn)行選擇；
連續(xù)組裝相比于間歇釜中具有明顯的優(yōu)勢，納米顆粒的生產(chǎn)可重現(xiàn)性高，批次間的差異較小，這為擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模和實(shí)現(xiàn)臨床應(yīng)用提供了保障；
面對醫(yī)藥行業(yè)的飛速發(fā)展，對藥物、疫苗在體內(nèi)安全輸送、給藥的要求日益提高，納米顆粒的連續(xù)制備必將成為加速納米醫(yī)藥研究的重要實(shí)驗(yàn)工具。
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