血清鐵濃度測試盒(比色法)測定與注意事項(xiàng):
一、測定:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到520 nm,蒸餾水調(diào)零。
2.標(biāo)準(zhǔn)液解凍:提前取出標(biāo)準(zhǔn)液,置于室溫下充分解凍后混勻。
3.空白管:取ep管,依次加入125μl蒸餾水,125μl試劑一,125μl試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入62μl氯仿(自備),充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液210μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm測定吸光度,記為a空白管。
4.標(biāo)準(zhǔn)管:取ep管,依次加入125μl標(biāo)準(zhǔn)液,125μl試劑一,125μl試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入62μl氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液210μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm測定吸光度,記為a標(biāo)準(zhǔn)管。
5.測定管:取ep管,依次加入125μl血清,125μl試劑一,125μl試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入62μl氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液210 μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm測定吸光度,記為a測定管。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
血清鐵濃度計(jì)算公式:
血清鐵含量(μmol /dl)=[c標(biāo)準(zhǔn)液×(a測定管-a空白管)÷(a標(biāo)準(zhǔn)管-a空白管)]×v總
=10 × (a測定管-a空白管)÷(a標(biāo)準(zhǔn)管-a空白管)
c標(biāo)準(zhǔn)液:100 μmol/l fe3+標(biāo)準(zhǔn)液;v總:標(biāo)準(zhǔn)液總體積1ml;1 dl=0.1 l。
二、注意事項(xiàng):
1、血清鐵含量少,所用器皿(ep管)需要注意,避免被鐵污染。
2、試劑一和試劑二溶液不穩(wěn)定,需現(xiàn)配現(xiàn)用,新配制的試劑只能當(dāng)天使用。
3. 檢出限為1μmol/l。
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到520 nm,蒸餾水調(diào)零。
2.標(biāo)準(zhǔn)液解凍:提前取出標(biāo)準(zhǔn)液,置于室溫下充分解凍后混勻。
3.空白管:取ep管,依次加入125μl蒸餾水,125μl試劑一,125μl試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入62μl氯仿(自備),充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液210μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm測定吸光度,記為a空白管。
4.標(biāo)準(zhǔn)管:取ep管,依次加入125μl標(biāo)準(zhǔn)液,125μl試劑一,125μl試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入62μl氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液210μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm測定吸光度,記為a標(biāo)準(zhǔn)管。
5.測定管:取ep管,依次加入125μl血清,125μl試劑一,125μl試劑二,混勻后蓋緊,置于沸水浴5min,自來水冷卻。加入62μl氯仿,充分震蕩混勻;室溫10000rpm,離心10min,小心吸取上層液210 μl,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm測定吸光度,記為a測定管。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
血清鐵濃度計(jì)算公式:
血清鐵含量(μmol /dl)=[c標(biāo)準(zhǔn)液×(a測定管-a空白管)÷(a標(biāo)準(zhǔn)管-a空白管)]×v總
=10 × (a測定管-a空白管)÷(a標(biāo)準(zhǔn)管-a空白管)
c標(biāo)準(zhǔn)液:100 μmol/l fe3+標(biāo)準(zhǔn)液;v總:標(biāo)準(zhǔn)液總體積1ml;1 dl=0.1 l。
注意事項(xiàng):
1、血清鐵含量少,所用器皿(ep管)需要注意,避免被鐵污染。
2、試劑一和試劑二溶液不穩(wěn)定,需現(xiàn)配現(xiàn)用,新配制的試劑只能當(dāng)天使用。
3. 檢出限為1μmol/l。
關(guān)鍵詞:分光光度計(jì) 酶標(biāo)儀 濃度計(jì)