美國金鐘連翹
美國金鐘連翹為木犀科連翹屬的半常綠灌木，是連翹和金鐘花的雜交種，性狀集中金鐘和連翹優(yōu)點，早春滿枝金黃，艷麗可愛，生長期枝條拱形展開，尤以晚秋冬初翠綠欲滴，形成一道亮麗的風景線，近年來在園林中廣為應用[1]。美國金鐘連翹多以扦插法繁殖，存在繁殖率低、苗木質量差、不整齊等不利因素，極大地限制了這一優(yōu)良品種在園林中的應用規(guī)模。利用組培快繁技術對美國金鐘連翹進行快速繁殖，可在短期內生產出大量整齊、均勻的健壯植株，并有利于種質資源的保存、優(yōu)良品種的應用與推廣，以及為基因克隆和生產轉基因植株做準備材料[2]。
1材料與方法
1.1材料
供試材料為從南京中山植物園引種的美國金鐘連翹。
1.2方法
1.2.1外植體的處理。選擇生長健壯、潔凈并且無病蟲害、當年生長的植株。剪取帶腋芽的莖段切成長1.5cm的切段，在流水下沖洗2~5h，用飽和漂白粉液浸泡25min，在超凈工作臺上用0.1%的hgcl2溶液浸泡5min，無菌水沖洗5次后接種。
1.2.2增殖培養(yǎng)。在ms+naa 0.1mg/l的培養(yǎng)基中，分別加入0mg/l、0.5mg/l、1.0mg/l、1.5mg/l、2.5mg/l的6-ba；在ms+6-ba 1.0mg/l的培養(yǎng)基中，加入0.1mg/l的naa、iba和iaa，觀察試管苗的生長和增殖情況。培養(yǎng)基含蔗糖30 g/l、瓊脂7g/l。每種培養(yǎng)基用于統(tǒng)計的樣品為隨機抽取15瓶，每瓶中只接1個外植體，增殖系數(shù)定義為每個外植體所產生新芽的個數(shù)。
1.2.3生根培養(yǎng)。在1/2ms的培養(yǎng)基中，加入不同濃度的iba、naa和iaa，觀察試管苗的生根情況。培養(yǎng)基含蔗糖15g/l、瓊脂7g/l。每種培養(yǎng)基用于統(tǒng)計的樣品為隨機抽取20瓶，每瓶中只接1個叢生芽，統(tǒng)計生根率。
1.2.4培養(yǎng)條件。培養(yǎng)溫度25~28℃，光照11~12h/d，光強1 000~1 500lx，培養(yǎng)基ph值5.9。
2結果與討論
2.1增殖培養(yǎng)
將帶節(jié)莖切段接種到不同濃度的6-ba的ms+naa 0.1mg/l 培養(yǎng)基上，培養(yǎng)至第九天時在多數(shù)培養(yǎng)基上外植體節(jié)上有側芽萌動，培養(yǎng)至第十七天時在一些培養(yǎng)基上莖兩端切口處形成愈傷組織，培養(yǎng)至第三十六天時大多數(shù)培養(yǎng)基上有芽生成，第四十五天時統(tǒng)計產生的新芽數(shù)量，計算增殖系數(shù)，結果如圖1所示。由圖1可知，隨著6-ba濃度的增大，試管苗的增殖系數(shù)表現(xiàn)為先上升后下降的趨勢。當6-ba濃度為1.0mg/l時，試管苗的增殖系數(shù)為6.3，顯著高于其他各濃度處理。
在ms+6-ba 1.0mg/l的培養(yǎng)基中，分別加入0.1mg/l的naa、iba和iaa，統(tǒng)計試管苗的增殖系數(shù)，其結果如圖2所示。圖2表明，相同濃度的naa、iba和iaa對試管苗的增殖系數(shù)的影響不盡相同。其中naa為0.1mg/l時試管苗增殖系數(shù)最大，顯著高于iba和iaa。綜合圖1和圖2可知，美國金鐘連翹試管苗增殖的最適培養(yǎng)基應為ms+6-ba 1.0mg/l+naa 0.1mg/l。
2.2生根培養(yǎng)
將培養(yǎng)在ms+6-ba 1.0mg/l+naa 0.1mg/l的增殖苗切成單芽植株，接種到分別添加0.5mg/l、1.0mg/l、1.5mg/l、2.0mg/l、2.5mg/l的iba、naa和iaa的1/2ms培養(yǎng)基中，觀察試管苗的生根情況，統(tǒng)計生根率，結果如圖3所示。由圖3可知，當激素濃度相同時，添加iaa顯著有利于促進試管苗的生根；當iaa濃度為1.5mg/l，試管苗的生根系數(shù)最大，達98.7%。因此，最適合美國金鐘連翹試管苗生根培養(yǎng)的培養(yǎng)基為1/2ms+iaa 1.5mg/l。
2.3試管苗的移栽
試管苗在瓶內生根后，在自然光照和溫度20~25℃的條件下煉苗20d左右，當苗高7~10cm、有4~5條白色長根時，從瓶內取出洗凈培養(yǎng)基，然后移栽到蛭石中，每天澆horland營養(yǎng)液，并加塑料袋保濕，10d后成活率達84.3%。定植于腐殖土中并移入溫室栽培，最終成活率可達91.2%。
3參考文獻
[1] 虞敏，虞德源.美國金鐘連翹[j].中國花卉園藝，2002（12）：14-15.
[2] 唐道城，梁順祥.觀賞植物組織培養(yǎng)研究進展[j].青海大學學報（自然科學版），2006（4）：26-29.