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      2. 玫瑰組織培養(yǎng)的方法

        發(fā)布時間:2024-03-01
        量31 玫瑰有性生殖能力差,大多觀賞價值高的品種不形成種子,種子繁殖不現(xiàn)實。而玫瑰實生苗觀賞價值較差,因此生產(chǎn)上必須通過野薔薇扦插再嫁接進行繁殖。利用組織培養(yǎng)技術可以實現(xiàn)玫瑰優(yōu)良品種的快速繁殖,并且能保持原有的優(yōu)良性狀不變。玫瑰組培增殖系數(shù)為4~5,半年至一年內(nèi)能獲得上百萬種苗。
        一、玫瑰組織培養(yǎng)的方法
        1.獲得無病毒植株
        玫瑰在生長過程中,能感染一種或數(shù)種病毒或類病毒。長期營養(yǎng)繁殖,如扦插、嫁接、分株,不僅不能脫毒,反而使病毒積累,嚴重影響玫瑰的品質(zhì),導致玫瑰觀賞價值下降,比如花徑變小、色澤變淡、產(chǎn)花減少、斑點較多、花形不規(guī)則、易感染病蟲等。通過組織培養(yǎng)技術,利用玫瑰莖尖脫毒后,使玫瑰的種性得到復壯,生長勢增強,花徑增大,色澤鮮艷,抗病能力提高,產(chǎn)花量上升。
        2.培育新品種
        在組織培養(yǎng)過程中往往會發(fā)生芽變,芽變的結(jié)果導致花色變異、花的大小變異、花期變異、葉色變異、染色體數(shù)量變異等。在組織培養(yǎng)過程中,一旦發(fā)生芽變,準確切取變異芽,并將其繁殖成完整植株,可產(chǎn)生有特殊觀賞價值的新品種。
        3.種質(zhì)資源的保存
        玫瑰種質(zhì)資源豐富,按傳統(tǒng)方法保存種質(zhì)資源占地面積大,且資源易受人為因素和環(huán)境因素的破壞而丟失。用組培方法,用極小的空間就可長期有效地保存玫瑰的種質(zhì)資源。
        二、玫瑰組織培養(yǎng)的方法
        1.外植體選取
        從生長在田間或盆栽的優(yōu)良品種植株上,選取生長健壯、無病蟲害的當年生枝條的莖尖和幼莖。取材最好在晴天正午,并且取用植株上部的幼莖。陰雨天或靠近地面的幼莖,表面污染較為嚴重,難于消毒。玫瑰除用莖尖和幼莖做外植體外,也可以用葉片、葉柄、根、莖、原生質(zhì)體、胚、花藥、子房、花萼和花托做外植體。
        2.消毒滅菌及無菌苗的建立
        取玫瑰外植體,用5%~10%的次氯酸鈉浸泡10~30min或用01%~02%的hgcl浸泡5~15min。用無菌水清洗7~10次后接種。也可先用75%的酒精浸泡20~30s再采用上述方法消毒。消毒滅菌完畢后,將幼莖切割成05~10cm長的至少帶有一個節(jié)的切段,接種于培養(yǎng)基中。
        玫瑰的增殖培養(yǎng),一靠無菌苗切段繁殖,二靠誘導不定芽,形成從生苗;三靠愈傷組織形成體細胞胚或原球胚。將已長大的月季嫩莖切成帶1~2個節(jié)的莖段,投入新鮮的增殖培養(yǎng)基上,5~6周進行一次繼代增殖,增殖系數(shù)平均達4~6。在外植到培養(yǎng)10~15d內(nèi)第一葉的葉原基伸長,第二葉片葉原基可見;15~20d側(cè)芽伸長;25~30d長度達6~10mm,繼代增殖會按幾何級數(shù)增長起來。增殖培養(yǎng)基可用不定芽誘導培養(yǎng)基,如ms+ba03~05+naa0004~03mg/l。
        3.壯苗與生根
        壯苗培養(yǎng)的培養(yǎng)基為:ms+ba03~05+naa001~01或ms+ba03~05+iba03。 也可以壯苗為主,增殖為輔,使增殖與壯苗合二為一。玫瑰組培苗增殖與壯苗需光照10~12h,光照強度2000lx,溫度24~26℃。
        一般情況下,玫瑰莖段組織培養(yǎng)8~10d內(nèi)則可生根。加入適量的活性炭有利于玫瑰生根。
        4.煉苗與大田移栽
        煉苗和大田移植是玫瑰微繁殖獲得成功的最后階段。組培幼苗由人為培養(yǎng)環(huán)境轉(zhuǎn)移到天然生長環(huán)境中,環(huán)境條件發(fā)生巨大變化,濕度大幅度降低,溫度不恒定,光照強烈,微生物多,故需煉苗過渡。一般玫瑰微繁殖煉苗需經(jīng)過室內(nèi)三天的取蓋煉苗,然后將苗從瓶中取出,洗去根部培養(yǎng)基,定植在珍珠巖、泥炭、蛭石或沙土中,用3~5%的多菌靈噴洗。煉苗時要注意基質(zhì)中的水分含量,水分太少,不能滿足苗生長發(fā)育;水分太多,導致爛苗。煉苗中、后期要注意通氣,給予足夠的光照,其幼苗成活率可達80%以上。
        三、玫瑰組織培養(yǎng)中應注的問題———褐化現(xiàn)象
        褐化現(xiàn)象是指外植體在培養(yǎng)過程中切口產(chǎn)生的多酚類物質(zhì)被氧化成褐色的醌類物質(zhì)毒害植物自身,導致培養(yǎng)材料褐變死亡的現(xiàn)象。玫瑰在組織培養(yǎng)中褐化現(xiàn)象嚴重,可采取以下措施:
        1.采用適宜的外植體 比如實生苗莖尖、枝條頂芽、幼胚等,在取外植體之前對母樹進行遮光處理20~40d。
        2.適宜的無基鹽分 適宜的無基鹽分,降低蔗糖濃度,降低激素水平,加吸附劑05%~25%的活性炭可以減輕材料的褐變。
        3.在培養(yǎng)基中加入抗氧化劑和其他抑制劑 如有機酸、蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物,氨基酸,硫脲,二氨基二硫化甲酸鈉,亞硫氫酸鈉,氰化鉀,二硫蘇糖醇多氨等,可有效的抑制褐變。
        4.反復轉(zhuǎn)移,降低溫度,進行暗培養(yǎng),增大培養(yǎng)基硬度,是控制褐常用且有效的方法。
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