蜥蜴17羥孕酮（17-ohp）elisa試劑盒使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
細菌凍存液50ml
pucm-t載體20次
pgl6(報告基因質粒)1μg
pgl6-ta(報告基因質粒)1μg
pgl6-mir(報告基因質粒)1μg
pap1-luc(報告基因質粒)1μg
pap1-ta-luc(報告基因質粒)1μg
pare-luc(報告基因質粒)1μg
pgre-luc(報告基因質粒)1μg
pisre-ta-luc(報告基因質粒)1μg
pmyc-ta-luc(報告基因質粒)1μg
pnfκb-luc(報告基因質粒)1μg
pnfκb-ta-luc(報告基因質粒)1μg
pp53-ta-luc(報告基因質粒)1μg
prb-ta-luc(報告基因質粒)1μg
pstat3-ta-luc(報告基因質粒)1μg
paat-promoter-luc(報告基因質粒)1μg
pil-6-promoter-luc(報告基因質粒)1μg
ptnf-α-promoter-luc(報告基因質粒)1μg
ptnf-α-promoter-ta-luc(報告基因質粒)1μg
pcmv-blank1μg
pcmv-c-bfp(藍色熒光蛋白)1μg
pcmv-c-cfp(青色熒光蛋白)1μg
pcmv-c-dsred(紅色熒光蛋白)1μg