msp-zewb 對水溶蛋白非特異吸附低,提取細(xì)胞外游離核酸時可不去 蛋白(耐受殘留細(xì)胞干擾),提取效力強(qiáng)于硅醇磁珠,適合血漿、血清、羊 水中循環(huán)非細(xì)胞dna(circulatingcell-freedna,cfdna)。需長時間保存所 提取的 cfdna 則宜變性蛋白,終濃度>3.0m 鹽酸胍適用。
吸附核酸時 msp-zewb 對核酸片段長度的選擇性與硅醇磁珠相反: 對短鏈核酸效力強(qiáng)于長鏈核酸。選擇提取短鏈核酸為msp-zewb 特色。 提取cfdna 備選流程:用蛋白酶 k 室溫處理液體樣品約 10min 滅活 其中dna 酶;用吸附緩沖液調(diào)節(jié)混合物 ph 到 3.5~4.2 并稀釋以降低離子 強(qiáng)度,再加磁珠吸附 cfdna;洗滌磁珠,后洗脫所吸附的 cfdna。
提取樣品中短鏈 cfdna,是 msp-zewb 的優(yōu)勢應(yīng)用之一。