elisa簡要操作步驟及原理以雙抗體夾心法為例，elisa簡要操作步驟如下：
包被抗體包被到酶標板,加樣本/標準品,加生物素標記的檢測抗體,加hrp標記的鏈霉親和素
加顯色底物tmb,加終止液,elisa 試劑盒組分酶標板（microplate）,酶標板，在elisa（酶聯(lián)免疫吸附測定）中作為載體的酶標板對抗原抗體或抗原抗體復(fù)合物的吸附起著重要作用。
標準品（standard）
標準品即為已知濃度的目標物(樣本中待測因子)的純蛋白，對標準品進行梯度稀釋，用于制作標準曲線。
生物素標記的檢測抗體(detected antibody)
檢測抗體即為與目標物特異性結(jié)合的抗原/抗體鑒于酶標二抗的局限性，現(xiàn)在廠家一般引入生物素親和素系統(tǒng)(biotin avidin system,bas)。
洗滌液(washing buffer)
長時間的孵育后，會出現(xiàn)非特異性結(jié)合，這時就需要洗滌液來洗去非特異性結(jié)合的蛋白或抗體。常用的洗滌液有:磷酸鹽緩沖液(pbs)、平衡鹽緩沖液(bbs)等。
辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(hrp-streptavidin)
鏈霉親和素是streptomyces avidinii(阿維丁鏈霉菌)的分泌物。鏈霉親和素分子由4條相同的膚鏈組成，非特異性結(jié)合遠比親和素低。在elisa試劑盒中，用于與檢測抗體上的生物素相結(jié)合。
顯色底物 (tmb)
tmb在過氧化氫存在的情況下可被hrp或其他過氧化物酶催化生成可溶的藍色物一價物。當顯色反應(yīng)被酸性溶液終止后，產(chǎn)物由藍色一價物轉(zhuǎn)為二價物，此時可在450nm 測定吸光度檢測。