哈嘍，相信有實驗經驗的小伙伴，對于“離子對試劑”這個名詞并不陌生，因為在我們日常檢測中會經常出現(xiàn)它們的身影，它們也實實在在幫助我們在日常檢測中，解決了很多棘手的問題。下面小編就簡單帶大家認識下這位日常檢測幫助良多的“大功臣”。
01
原理
使用液相色譜法分析電離能力比較強的樣品時，樣品在反相色譜柱上的保留時間很短或者根本不保留，這時要加入相應的離子對試劑，將分析物上的離子進行結合，形成在柱子上有保留的分子。
02
離子對試劑種類
離子對試劑的種類和濃度對分離效果都有較大的影響。離子對試劑種類的選擇依賴于被分離樣品的性質。
●被分離溶質是強酸或強堿，離子對試劑可以是強酸或強堿，弱堿或弱酸。
●被分離的溶質是弱酸或弱堿，則選用的離子對試劑必須是強堿或強酸。
●對于溶質結構性質相差較大的混合樣品，離子對試劑種類的選擇并沒有特殊要求。
●離子對試劑疏水性的差別可以通過調節(jié)離子對試劑濃度和有機溶劑濃度獲得滿意的分離效果。
1.用于酸性化合物：四丁基氫氧化銨（10%水溶液） 、四丁基溴化銨、十二烷基三甲基氯化銨。
2.用于堿性化合物：戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉 、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、癸烷磺酸鈉。
3.其他離子對試劑：高氯酸鈉、三氟yi酸、七氟丁酸等。
常用離子對試劑 cas號：
1-戊烷磺酸鈉cas:22767-49-3
1-己烷磺酸鈉cas:2832-45-3
1-庚烷磺酸鈉cas:22767-50-6
1-辛烷磺酸鈉cas:5324-84-5
1-癸烷磺酸鈉 cas:13419-61-9
03
離子對試劑選用步驟
1．選擇一根適合的色譜柱，常為c18柱。
2．準備流動相時僅使用hplc級別的水和色譜級試劑。
3．選擇能給出最佳分離度的流動相成分和濃度。
4．如果樣品中有非離子化物質，在嘗試離子化分離之前首先優(yōu)化分離情況。
5．選擇合適的離子對系列試劑以提供相應的離子配對：對于酸性分析物使用酸性離子對試劑；對于堿性分析物使用堿性離子對試劑。
6．通過比較選擇所得分離度zui 好的離子對試劑。
7．一旦離子對試劑已經確定，調節(jié)流動相的ph值將分離度zui大化；因為微小的ph值改變對保留性質和選擇性都有較大的影響，所以仔細的小幅度調節(jié)ph值。
8．理想狀況下，流動相中的離子對試劑濃度應為0.005m，但是稍微增加離子對試劑可能會稍微增加保留性質并因此優(yōu)化分離情況。
優(yōu)點
1．緩沖液制備簡單。
2．使用反相色譜柱，碳鏈長度選擇眾多，可用于增加保留時間、改善分離性質。
3．即使使用較大離子，也能得到清晰的峰形且保持結果高度重現(xiàn)性。
4．分離時間縮短（與離子交換相比）。
5．適用于復雜混合物的分離（不同于離子抑制法）。
6．能夠同時分離離子化和非離子化的分析物。
7．有效改善峰形。
缺點
1．對色譜柱傷害較大。離子對試劑會對色譜柱造成不可逆的傷害，離子對試劑和固定相結合產生不可逆吸附，進而影響固定相活性位點。比如十八烷基硅膠鍵合色譜柱，這種反應對色譜柱影響很大，而且離子對試劑很難從色譜柱上沖洗干凈，會大大縮短色譜柱的使用壽命。
2．實驗條件不穩(wěn)定。離子對試劑的濃度與其樣品的保留時間有直接的影響，而且離子對試劑對ph值比較敏感，配制流動相時要求精確度較高。否則直接影響實驗的重復性和重現(xiàn)性。
3．用離子對試劑的實驗色譜柱平衡時間較長，一般都建議小流速過夜平衡。