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      2. 怎樣避免在培育中胎牛血清黑點(diǎn)生成

        發(fā)布時間:2024-09-05
        (1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
        (2) 培育基無需37℃水浴。
        (3) 培育基保持zuiph 值7.0-7.2。
        (4) 嚴(yán)格控制制造培育基的水質(zhì),容器定期刷洗。
        (5) 掌握細(xì)胞傳代的zui機(jī)遇,細(xì)胞切勿生長過老。
        一、化凍
        將血清從-20 度冰箱中取出,室溫(或浸于自來水中)化凍(約需求30分鐘至2小時,也可放于4度冰箱化凍過夜;化凍后若不馬上滅活,可以放入4度冰箱中暫時保存)
        二、滅活
        (1)放入室溫的水浴鍋內(nèi)開端加熱(一起放入一個空的血清瓶,內(nèi)裝100ml自來水,插入一根溫度計(jì),溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn))
        (2)當(dāng)溫度計(jì)顯示56度時,停止加熱,改為連續(xù)加熱,保持56度(±0.5度)30分鐘(±3分鐘;若不小心使溫度上升超過56度,則:若仍未超過60度,且時間很短,比如不超過5分鐘,則仍可運(yùn)用;若超過60度,或許時間較長,則棄去不用,或許測驗(yàn)用于一些一般細(xì)胞的培育)
        (3)取出,天然冷卻至室溫(約需1-3小時),可分裝或-20度繼續(xù)凍存。
        三、分裝
        (1)轉(zhuǎn)入無菌間,在超凈臺內(nèi)將血清分裝入10ml離心管中(留意預(yù)先要將血清輕輕搖動數(shù)周、混勻;用吸液管或吹大管吹出血清時要留意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很簡單產(chǎn)生氣泡;假如產(chǎn)生氣泡, 則在酒精燈火焰上過一下)。
        (2)放入-20 度冰箱凍存。
        (3)全部操作約需求4-6小時。
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