近年來，在細(xì)胞治療、生物藥物研發(fā)和生產(chǎn)過程中，支原體檢測是確保產(chǎn)品質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。支原體是一種微生物，它可能對生物醫(yī)藥產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性產(chǎn)生負(fù)面影響。因此，對支原體進(jìn)行檢測和控制是為了減少對細(xì)胞的危害、防止支原體從各種途徑污染生物制品、減少支原體污染對生物醫(yī)藥產(chǎn)品質(zhì)量、患者與經(jīng)濟(jì)帶來的損失。支原體污染檢測作為生物藥產(chǎn)品開發(fā)的重要質(zhì)控指標(biāo)，必須在各個過程中進(jìn)行，包括原材料、細(xì)胞庫、病毒種子庫、未加工的收獲液材料和最終產(chǎn)品。
什么是支原體
支原體（mycoplasma）是一種無細(xì)胞壁的已知體積最小的原核微生物，可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖，其大小介于細(xì)菌和病毒之間（直徑約0.1-0.8 µm），因此一般細(xì)菌過濾器（0.22 µm）無法有效去除。支原體污染在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域普遍存在。包括以細(xì)胞為基質(zhì)生產(chǎn)的生物制品，如病毒性疫苗、重組生物技術(shù)產(chǎn)品等。
注：大部分支原體種類粘附在細(xì)胞表面，少量可在內(nèi)部
支原體研究簡史
重要發(fā)現(xiàn):
1956:johns hopkins科學(xué)家報道hela細(xì)胞的支原體污染
1990:fda檢測了2萬個細(xì)胞培養(yǎng)物，發(fā)現(xiàn)15%有支原體污染
1991:阿根廷科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，來自200份樣本中的70%是有污染
2002:dsmz發(fā)現(xiàn)440株細(xì)胞系中的28%是有污染
2015年一份《nucleic acid research》的研究支出，9395個樣本rna數(shù)據(jù)中，884個（11%）有支原體特異性序列
法規(guī)指南/風(fēng)險評估
中國藥典2015版三部：生物制品生產(chǎn)檢定用動物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制
中國藥典2020版四部：3301 支原體檢查法
歐洲藥典 2.6.7：mycoplasmas
美國藥典 <63>：mycoplasma tests
人用藥品技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)理事會，ich q5d:用于生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì)的來源和鑒定
fda:用于生產(chǎn)生物制品的細(xì)胞系檢定的考慮要點(1993)
fda:在生產(chǎn)和檢測人用單克隆抗體產(chǎn)品時的考慮要點(1997)
fda:用于生產(chǎn)傳染病適應(yīng)癥病毒疫苗的細(xì)胞基質(zhì)和其他生物材料的檢定和驗證（2010 ）
國家藥審中心關(guān)于發(fā)布《免疫細(xì)胞治療產(chǎn)品藥學(xué)研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》的通告（2022年第30號）
支原體檢測樣本
支原體檢測是生物制品質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)，在生物制品過程中，為確保生物制品的安全性和有效性，涉及到的細(xì)胞與生物源性材料，均需要進(jìn)行支原體檢測。對于細(xì)胞治療產(chǎn)品而言，在生產(chǎn)過程不同階段涉及到的所有生物源性材料、病毒載體生產(chǎn)細(xì)胞、病毒載體、car-t細(xì)胞產(chǎn)品，均需要進(jìn)行支原體檢測。
翼和支原體檢測試劑盒