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乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，ldh）活性檢測試劑盒商品貨號：ms1001
英文名稱：micro lacate dehydrogenase（ldh）assay kit
別名：乳酸脫氫酶試劑盒 ldh kit 乳酸脫氫酶（ldh）試劑盒 乳酸脫氫酶（ldh）測試盒
檢測方法：微量法
商品貨號：商品品牌：規(guī)格基本售價選擇規(guī)格
ms1001-100管/48樣 索橋生物 100管/48樣 ￥330.00元
產(chǎn)品詳細介紹產(chǎn)品說明書
測定意義：
ldh（ec 1.1.1.27）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應，伴隨著nad+/nadh之間互變。
測定原理：
ldh催化nad+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
貨號：ms1001 規(guī)格：100管/48樣
乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，ldh）試劑盒說明書
微量法
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
ldh（ec 1.1.1.27）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應，伴隨著nad+/nadh之間互變。
測定原理：
ldh催化nad+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
自備實驗用品及儀器：
可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：60ml×1瓶， 4℃保存；
試劑一：液體5ml×1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑×1支，-20℃保存，用時加入1.3 ml蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑
分裝后-20℃保存，禁止反復凍融；
試劑三：液體5 ml×1瓶，4℃避光保存；
試劑四：液體20ml×1瓶，4℃保存；
樣品測定的準備：
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為1000~5000：1的比例（建議2000萬細菌或細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200w，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm，蒸餾水調(diào)零。2、樣本測定（在ep管中加入下列試劑）
試劑名稱(μl)
測定管
對照管
樣本
10
10
試劑一
50
50
試劑二
10
蒸餾水
10
充分混勻，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）準確水浴15min
試劑三
50
50
充分混勻，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）準確水浴15min
試劑四
150
150
充分混勻，室溫靜置15min， 450 nm下測定吸光度，計算δa=a測定管-a對照管。每個測定管需要設一個對照管。
ldh活力單位的計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標準條件下測定的回歸曲線， y = 0.725x (x為標準品濃度，μmol/ml；y為對吸光度)。
2、血清（漿）ldh活力的計算
單位的定義：每ml血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
ldh（nmol/min/ml）=δa÷0.725÷t×103=92×δa
3、細胞、細菌和組織中l(wèi)dh活力的計算
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
ldh（nmol/min/mg prot）=[δa÷0.725×v1]÷(v1×cpr)÷t×103 =92×δa÷cpr
需要另外測定，建議使用本公司bca蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。
（2） 按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
ldh（nmol/min/g鮮重）=[δa÷0.725×v1]÷(w×v1÷v2)÷t×103 =92×δa÷w
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
ldh（nmol/min/104 cell）= [δa÷0.725×v1]÷(2000×v1÷v2)÷t×103 =0.046×δa
v1：加入反應體系中樣本體積，0.01ml；v2：加入提取液體積，1 ml；t：反應時間，15 min；cpr：蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；w：樣本質(zhì)量，g；2000：細胞或細菌總數(shù)，2000萬；103：1umol/ml=103 nmol/ml。
b.使用96孔板測定的計算公式如下：
1、標準條件下測定的回歸曲線， y = 0.3625x (x為標準品濃度，μmol/ml；y為對吸光度)。
2、血清（漿）ldh活力的計算
單位的定義：每ml血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
ldh（nmol/min/ml）=δa÷0.3625÷t×103=184×δa
3、細胞、細菌和組織中l(wèi)dh活力的計算
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
ldh（nmol/min/mg prot）=[δa÷0.3625×v1]÷(v1×cpr)÷t×103 =184×δa÷cpr
需要另外測定，建議使用本公司bca蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。
（2） 按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
ldh（nmol/min/g鮮重）=[δa÷0.3625×v1]÷(w×v1÷v2)÷t×103 =184×δa÷w
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
ldh（nmol/min/104 cell）= [δa÷0.3625×v1]÷(2000×v1÷v2)÷t×103 =0.092×δa
v1：加入反應體系中樣本體積，0.01ml；v2：加入提取液體積，1 ml；t：反應時間，15 min；cpr：蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；w：樣本質(zhì)量，g；2000：細胞或細菌總數(shù)，2000萬；103：1umol/ml=103 nmol/ml。
輔酶ⅰ系列
qs1000 輔酶ⅰnad(h)含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 500
ms1000 輔酶ⅰnad(h)含量測試盒 微量法 100管/48樣 920
qs1001 乳酸脫氫酶（ldh）測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 170
ms1001 乳酸脫氫酶（ldh）測試盒 微量法 100管/48樣 330
qs1002 nad-蘋果酸脫氫酶（nad-mdh）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 280
ms1002 nad-蘋果酸脫氫酶（nad-mdh）測試盒 微量法 100管/96樣 550
qs1003 nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 320
ms1003 nadp-蘋果酸脫氫酶（nadp-mdh）測試盒 微量法 100管/96樣 600
qs1004 nadh氧化酶（nox）測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 450
ms1004 nadh氧化酶（nox）測試盒 微量法 100管/96樣 850
qs1005-50 檸檬酸合酶(cs）測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 3200
qs1005-25 檸檬酸合酶(cs）測試盒 可見分光光度法 25管/24樣 2000
ms1005 檸檬酸合酶(cs）測試盒 微量法 100管/48樣 3500
qs1006 丙酮酸脫羧酶（pdc）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 720
ms1006 丙酮酸脫羧酶（pdc）測試盒 微量法 100管/96樣 1400
qs1007 醇脫氫酶（adh）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 280
ms1007 醇脫氫酶（adh）測試盒 微量法 100管/96樣 550
qs1008 單脫氫抗壞血酸還原酶（mdhar）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 800
ms1008 單脫氫抗壞血酸還原酶（mdhar）測試盒 微量法 100管/96樣 1550
qs1009 乙醛脫氫酶（aldh）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 420
ms1009 乙醛脫氫酶（aldh）測試盒 微量法 100管/96樣 800
qs1010 nad激酶（nadk）測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 600
ms1010 nad激酶（nadk）測試盒 微量法 100管/48樣 1100
qs1011 線粒體呼吸鏈復合體ⅰ/nadh-輔酶q還原酶測試盒 紫外分光光度法 25管/24樣 1280
ms1011 線粒體呼吸鏈復合體ⅰ/nadh-輔酶q還原酶測試盒 微量法 100管/96樣 2500