elisa測定的原理是使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。
用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。
由于酶的催化頻率很高，故可極大地地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度。有時(shí)候會出現(xiàn)elisa試劑盒測定值與文獻(xiàn)報(bào)道相差太大的情況，以下內(nèi)容分析elisa試劑盒測定值與文獻(xiàn)報(bào)道相差太大的幾個原因：
一、同一種材料，不同處理、不同發(fā)育狀態(tài)和不同器官其生化指標(biāo)可能發(fā)生很大變化。因此，能夠直接用來比較的文獻(xiàn)資料本來就不多。
二、生化測定的首要目的是比較處理內(nèi)和處理間該指標(biāo)的變化。同時(shí)，要測定絕dui值，往往是很可能甚至不可能的。因此，追求的不是絕dui值而是相對值。
三、測定值如果與文獻(xiàn)報(bào)道相差太大，首先應(yīng)該檢查單位是否一致，包括摩爾還是毫摩爾，是干重、鮮重還是蛋白質(zhì)濃度，是分鐘還是秒，等等。其次，檢查計(jì)算是否有誤？后，如果相差不是數(shù)量級，通常是很正常的。
四、用不同測定方法和不同測定條件下得到的測定值可能存在很大差異。因此，如果測定方法不同，同一樣品的測定值通常是不可以直接比較的。這也是建議使用人elisa試劑盒測定的理由之一。因?yàn)椴煌髡哂猛辉噭┖袦y定的數(shù)據(jù)才是可以相互比較的。