植物組織樣本elisa檢測(cè)處理方法
植物樣本處理方法
一、組織勻漿的制備：
1、取組織塊（0.1g～0.5g）最少可到5～10mg在冰冷的pbs中漂洗，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱重，放入5ml的勻漿管中。
2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。
3、勻漿的方式：手工勻漿，機(jī)器勻漿。
① 手工勻漿：左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉(zhuǎn)動(dòng)研磨數(shù)十次（6～8分鐘），充分研碎，制成10%的勻漿液。
② 機(jī)器勻漿：用組織搗碎機(jī)10000～15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿，也可用內(nèi)切式組織勻漿機(jī)制備（勻漿時(shí)間10秒/次，間隙30秒，連續(xù)3～5次，在冰水中進(jìn)行,可適當(dāng)延長(zhǎng)勻漿時(shí)間），鏡檢觀察:
4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī)3000轉(zhuǎn)/分左右,離心10～15分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定.
二、勻漿介質(zhì)：
一般采用0.05 mol/l tris-hcl, ph 7.4 磷酸鹽緩沖液(pbs),客戶可根據(jù)樣本及測(cè)定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。
三、樣本保存:
植物組織樣本暫時(shí)不測(cè)定，可立即低溫凍存，溫度越低越好，中間如不-反-復(fù)凍融，-20℃以下可保 存三個(gè)月,-70℃以下可保存六個(gè)月